产品概述:
本试剂盒采用改进的SDS碱裂解法,吸附柱选择性地吸附DNA的方法达到快速纯化质粒DNA的目的。适合于从4ml(OD600=3.0)或者8ml(OD600=1.5)以内细菌培养物中提取多至40 μg高纯的质粒DNA,用于测序、体外转录与翻译、限制性内切酶消化、细菌转化等分子生物学实验。
一 、试剂盒组成、贮存、稳定性
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Cat.No. |
UE-MN-FP-10 |
UE-MN-FP-50 |
UE-MN-FP-250 |
UE-MN-FP-500 |
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Kit size |
10 preps |
50 preps |
250 preps |
500 preps |
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Miniprep column A3 |
10 |
50 |
250 |
500 |
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2 ml Collection tube |
10 |
50 |
250 |
500 |
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RNase A |
6 μl |
30 μl |
150 μl |
300 μl |
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Buffer S1A |
3 ml |
15 ml |
75 ml |
150 ml |
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Buffer S2A |
3 ml |
15 ml |
75 ml |
150 ml |
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Buffer S3K |
5 ml |
21 ml |
105 ml |
210 ml |
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Buffer W2B concentrate |
4 ml |
16 ml |
2×48 ml |
2×80 ml |
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Eluent |
1 ml |
5 ml |
25 ml |
50 ml |
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Protocol manual |
1 |
1 |
1 |
1 |
RNase A:50 mg/ml,室温可贮存6个月,长期贮存于-20℃。
Buffer S1A:细菌悬浮液,加入RNase A后,混合均匀,4℃贮存。
Buffer S2A:细菌裂解液(含 SDS/NaOH),室温密闭贮存。
Buffer S3K:中和液,室温密闭贮存。
Buffer W2B concentrate:去盐液。使用前,按试剂瓶上指定的体积加入无水乙醇(可用100%乙醇或95%乙醇)。混合均匀,室温密闭贮存。
Eluent:洗脱液,室温密闭贮存。
二 、注意事项
1. 加入Buffer S2A和Buffer S3K的两个步骤操作必须温和。剧烈摇晃将导致基因组DNA的污染。但混合必须充分,否则影响得率。
2. Buffer S2A使用后立即盖紧瓶盖,以免空气中的CO₂中和 Buffer S2A中的NaOH,降低裂解效率;裂解时间不宜超过5 min。
3. Buffer S2A、Buffer S3K含刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套和眼镜,避免沾染皮肤、眼睛和衣服,谨防吸入口鼻。若沾染皮肤或眼睛时,要立即用大量清水或生理盐水冲洗,必要时寻求医疗咨询。
三、实验准备
1. 第一次使用前,RNase A全部加入Buffer S1A 中,4℃贮存。
*对于小体积的RNase A,瞬时离心至管底,吸取一定体积Buffer S1A至RNase A管中混匀再加入Buffer S1A中。
2. Buffer S2A中含有SDS,低温容易析出,使用前若有沉淀,请置于37℃水浴中加热溶解至溶液变澄清方可使用。
3. 准备无核酸和核酸酶污染的Tip头、离心管。
4. 第一次使用前,Buffer W2B concentrate中加入指定体积的无水乙醇混匀备用,做好标记。







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