产品概述：
本试剂盒用于从各种植物叶片、多糖块茎/根部/种子、水果果肉以及真菌中提取总RNA。提取的总RNA分子完整、纯度高，适用于Northern Blot 、RT-PCR、体外翻译、Primer Extension 、S1核酸酶作图、RNase 保护测定、构建 cDNA 文库等各种分子生物学实验。
一、试剂盒组成、贮存、稳定性
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Cat.No. |
UE-MN-PP -RNA-10 |
UE-MN-PP -RNA-50 |
UE-MN-PP -RNA-250 |
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Kit size |
10 preps |
50 preps |
250 preps |
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Spin Columns NP |
10 |
50 |
250 |
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gDNA removal Columns |
10 |
50 |
250 |
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Collection Tubes（2mL） |
20 |
100 |
500 |
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Buffer RL-1 |
8 ml |
40 ml |
200 ml |
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Buffer PL-1 |
8 ml |
40 ml |
200 ml |
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Buffer RW1 |
8 ml |
40 ml |
200 ml |
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Buffer RW2 |
3 ml |
12 ml |
60 ml |
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RNase-Free ddH2O |
2 ml |
10 ml |
30 ml |
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Protocol manual |
1 |
1 |
1 |
Buffer RL-1：细胞裂解液RL。室温密闭贮存。低温下可能会有沉淀析出，需在60℃水浴让沉淀完全溶解并冷却至室温后使用。
Buffer PL-1：细胞裂解液PL。室温密闭贮存。低温下可能会有沉淀析出，需在60℃水浴让沉淀完全溶解并冷却至室温后使用。
Buffer RW1：洗涤液。室温密闭贮存。
Buffer RW2：去盐液，为浓缩液，使用前须按试剂瓶子标签所示，加入无水乙醇进行稀释。
中和液。室温密闭贮存。
RNase-Free ddH2O：RNA洗脱液。室温密闭贮存。
二、注意事项
1. RNA提取完成后建议置于冰上待用，若不能立刻进行后续实验，请保存于-80℃。
2. RNA分管尽快使用，电泳检测用无酶水进行冲洗，电泳缓冲液用RNA无酶水配置，提高电压并缩短跑胶时间。
3. 选新鲜组织样本，避免反复冻融，组织离体后须迅速放入液氮中速存，后期转移至-80℃长期保存。
4. 所有试剂用DEPC处理过的溶剂配制。请选用RNase-free枪头和离心管，以避免提取过程中RNA被RNase降解。
三 、实验准备
1. 自备试剂：无水乙醇（AR）、β-巯基乙醇或DTT
2. Buffer RW2在使用前需按照试剂瓶标签所示加入无水乙醇进行稀释后使用；
3. (可选)提升裂解液的变性能力：使用前分装适量Buffer RL-1或Buffer PL-1按每mL Buffer RL-1 或Buffer PL-1加入10µL β-巯基乙醇或20μL的2M DTT，混合液室温可保存1月。β-巯基乙醇/DTT 能打断 RNase分子间的二硫键，高效灭活 RNase，提高RNA质量。由于β-巯基乙醇/DTT 的毒性，多数情况下，不添加也可以得到完整的RNA。
4. 试剂盒提供多种裂解缓冲液：Buffer RL-1和Buffer PL-1，具体选择参考表1 。
5. 若不确定植物种类，推荐优先尝试Buffer PL-1。
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样本种类 |
推荐样本量 /mg |
样本示例 |
推荐裂解液 |
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Buffer RL-1 |
Buffer PL-1 |
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简单植物组织 （叶片、根、茎） |
50-100 |
小麦、水稻、玉米、菠菜、娃娃菜、豌豆苗、根茎 |
√ |
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多糖多酚植物叶片 |
桃叶、梅叶、梨叶、葡萄叶、月季花瓣 |
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√ |
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淀粉含量高的植物组织 |
20-50 |
玉米种子、红豆种子、土豆 |
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√ |
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油性高的植物组织 |
油菜籽 |
√ |
√ |
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水果果肉 |
100-500 |
西瓜、苹果 |
√ |
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真菌 |
20-100 |
香菇、金针菇 |
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√ |
表1 不同种类样本推荐的样本处理量及裂解液
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