产品介绍

AugeGreen是一种用于实时定量PCR（qPCR）的DNA结合染料。该染料的诸多优点使它远胜于SYBR Green I。除了有相似的光谱特性，AugeGreen有三个主要特点使它区别于SYBR Green I。

首先，AugeGreen对PCR的抑制性远小于SYBR Green I。因此，使用AugeGreen进行的qPCR实验可以使用快速PCR步骤。同时，AugeGreen在实验中可以使用较高的浓度，从而获得远强于SYBR Green I扩增信号。较高浓度的AugeGreen也消除了“染料重分布”的缺陷，使AugeGreen既可用于多重PCR，也可用于高分辨率（高清晰）熔解曲线分析（HRM）。该分析正被越来越多的用于PCR后的基因分型和异源双链分析。由于SYBR Green I对PCR的抑制性，从而要求其使用浓度必须很低，因此SYBR Green I无法解决由低浓度造成的染料重分布问题，既不能用于多重PCR也不能用于HRM。同时，染料重分布问题也可能影响常规熔解曲线的可靠性，因为低熔点的DNA链可能由于这种原因而无法检测到。

第二，AugeGreen的稳定性极强。在正常的储存、操作和PCR过程中不会被破坏。在缓冲溶液中的染料可以安全的储存在室温或冰箱里，也可以反复冻融。与之相反，SYBR Green I不稳定而且降解后对PCR抑制性更强。

第三，AugeGree降低了细胞膜透性，因而比SYBR Green I更加安全。独立实验室的测试结果显示，AugeGreen既没有诱变性也没有细胞毒性。相反，虽然SYBR Green I本身诱变性很弱，但它在细胞中可能抑制了正常DNA的修复机制，使其有诱变增强作用。考虑到PCR的广泛使用，其安全性应该足够重视。

产品规格

1mL

储存条件

-20℃避光保存，有效期见外包装

应用范围

实时定量PCR、高分辨率溶解曲线

产品参数

λabs/λem = 500/530 nm (结合DNA)

λabs = 471 nm (未结合DNA)

AugeGreen染料特性

1. 光谱特性

图1. 在TE缓冲液中，结合到双链DNA中AugeGreen染料的

激发光谱（蓝色）和发射光谱（红色）

2. SYBR Green I与AugeGreen荧光染料的稳定性比较

图2. AugeGreen、SYBR Green I的吸收光谱1.2 µM, pH9的Tris缓冲液中，99℃孵育3 h后，两种荧光染料溶液的相对荧光强度，ROX作参照物

3. 染料的稳定性

Ames实验显示，AugeGreen染料没有细胞毒性和致突变性，该染料不具细胞膜渗透性（图3），这是其低细胞毒性的一个关键因素。相反地，众所周知，SYBR Green I荧光染料具有很强的致突变性，可能原因是其抑制了细胞内DNA修复机制（Ohta, etel. Mutat. Res.492, 91(2001)），而SYBR Green I较强的细胞毒性是由其较高的细胞膜渗透性所导致的（图3）。

图3. 37℃条件下，用SYBR Green I或AugeGreen（1.2 µM）孵育HeLa细胞，分别在5 min或30 min后拍照，观察荧光强度。SYBR Green I 迅速渗透进入细胞，然而AugeGreen几乎不具有细胞膜渗透性。