产品概述：
本试剂盒适合从PCR、酶促反应、测序反应的反应液中提取多至8 μg DNA（大于75 bp）,回收率为70-90%。纯化的DNA不含引物、酶蛋白及单核苷酸。
一、试剂盒组成、贮存、稳定性
|
Cat.No. |
UE-PCR-10 |
UE-PCR-50 |
UE-PCR-250 |
UE-PCR-500 |
|
Kit size |
10 preps |
50 preps |
250 preps |
500 preps |
|
Miniprep column C15 |
10 |
50 |
250 |
500 |
|
2 ml Microfuge tube |
10 |
50 |
250 |
500 |
|
1.5 ml Microfuge tube |
10 |
50 |
250 |
--- |
|
Buffer A |
6 ml |
28 ml |
145 ml |
280 ml |
|
Buffer PCR-A |
4 ml |
20 ml |
100 ml |
200 ml |
|
Buffer W2 concentrate |
5 ml |
24 ml |
2×72 ml |
2×120 ml |
|
Eluent |
1 ml |
5 ml |
25 ml |
50 ml |
|
Protocol manual |
1 |
1 |
1 |
1 |
Buffer A：制备管活化处理液，室温密闭贮存。
Buffer PCR-A：DNA结合溶液，室温密闭贮存。
Buffer W2 concentrate：去盐液。使用前，按试剂瓶上的指定体积加入无水乙醇（可用100%乙醇或95%无水乙醇）,混合均匀，室温密闭贮存。
Eluent：洗脱液，室温密闭贮存。
二、注意事项
1. Buffer PCR-A含刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套和眼镜，避免沾染皮肤、眼睛和衣服，谨防吸入口鼻。若沾染皮肤、眼睛时，要立即用大量清水或生理盐水冲洗，必要时寻求医疗咨询。
2. DNA分子呈酸性，建议在2.5 mM Tris-HCI，pH7.0-8.5洗脱液中保存。
3. 回收前核酸片段含量5-20 μg请选择UE-MX-PCR，洗脱液体积添加50-100 μl。
4. 回收率低建议：
1）步骤2之后混合液转移至吸附管可以放置2-5 min；
2）步骤2之后混合液过柱离心之后将滤液再次重复离心；
3）加热洗脱液温度；
4）洗脱液二次重复洗脱。
常见问题解答：
◆得率低或者得不到DNA
·Buffer W2中没有加入乙醇
Buffer W2在使用之前必需加入100%或者95%的乙醇。
·不合适的洗脱液
DNA只能在低盐和pH7.0的条件下有效的洗脱。应使用试剂盒提供的洗脱液或者用水（pH7.0）洗脱。在65℃下预热洗脱液可以提高洗脱效率。
·洗脱液体积不够或者没有浸润膜
洗脱液应加在制备膜的中央以确保其均匀的浸润整个膜。
·采用不合适的负压装置
确保负压保持在 -25至-30英尺汞柱。
◆DNA不能很好地用于下游实验
·洗脱时盐浓度过高
确保在洗脱之前盐分都被洗涤去除。正确使用Buffer W1，避免在管体上残留。
·样品上样电泳时样品跑出胶孔
洗脱液中残留有乙醇（样品会飘在琼脂糖凝胶孔中）
仔细的操作说明书中的所有步骤以去除残留的乙醇。
·洗脱液中含有引物二聚体
引物二聚体会影响后续的反应，如测序。任何大于40bp的引物二聚体都将不会被完全去除。结合完后，用750ul盐酸胍（35g盐酸胍溶于100ml去离子水）洗涤UE PCR清洁制备管或者制备板，然后再接着进行说明书中所述的洗涤洗脱步骤。
·洗脱液中含有变性的单链DNA，这在凝胶电泳中可见一条又小又淡又糊的条带
洗脱后，将洗脱液在95℃中温浴2min。在使用前冷却至室温。95℃温浴2min后也可以在洗脱液中加入10 mM NaCl以促进复性。
微信服务号