产品概述：
本试剂盒采用改进的SDS 碱裂解法，结合 DNA 制备膜选择性地吸附DNA的方法达到快速纯化质粒 DNA 的目的。适合于从30-100 ml（OD600 为1-1.5）细菌培养物中提取多至200 μg 高纯的质粒 DNA，用于测序、体外转录 与翻译、限制性内切酶消化、细菌转化等分子生物学实验。
一、试剂盒组成、贮存、稳定性
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Cat.No. |
UE-MD-P-10 |
UE-MD-P-25 |
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Kit size |
10 preps |
25 preps |
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Midiprep column |
10 |
25 |
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1.5 ml Microfuge tube |
20 |
50 |
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Plastic wrench |
1 |
1 |
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RNase A |
120 μl |
270 μl |
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Buffer S1 |
55 ml |
125 ml |
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Buffer S2 |
55 ml |
125 ml |
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Buffer S3K |
55 ml |
125 ml |
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Buffer B |
55 ml |
125 ml |
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Buffer W1 |
80 ml |
2×100 ml |
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Buffer W2 concentrate |
36 ml |
72 ml |
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Eluent |
6 ml |
20 ml |
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Protocol manual |
1 |
1 |
RNase A：50 mg/ml, 室温贮存6个月；长期贮存于-20℃。
Buffer S1：细菌悬浮液。加入RNase A后，混合均匀，4℃贮存。
Buffer S2：细菌裂解液（含SDS/NaOH）。室温密闭贮存。
Buffer S3K：中和液，室温密闭贮存。
Buffer B：DNA结合溶液，室温密闭贮存。
Buffer W1：洗涤液，室温密闭贮存。
Buffer W2 concentrate：去盐液。使用前，按试剂瓶上指定的体积加入无水乙醇（可用100%乙醇或95%乙醇）,混合均匀，室温密闭贮存。
Eluent：洗脱液，室温密闭贮存。
二、注意事项
1. 细菌过量将影响细菌裂解及质粒DNA的释放。
2. 在步骤3和步骤4中操作必须温和。剧烈摇晃，将导致基因组DNA的污染。但混合必须充分，否则影响得率。
3. 在加入Buffer S3K时，蛋白质和基因组DNA形成粘稠的白色絮状沉淀，必须充分混合均匀，使凝集块中间也得到充分中和凝结。
4. 将Eluent或去离子水加热至65℃，有利于提高洗脱效率。
5. DNA 分子呈酸性，建议在2.5 mM Tris-HCI, pH 7.0-8.5 洗脱液中保存。
Buffer S2、Buffer S3K、Buffer B和 Buffer W1试剂含刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套和眼镜，避免沾染皮肤、眼睛和衣服，谨防吸入口鼻。若沾染皮肤、眼睛时，要立即用大量清水或生理盐水冲洗，必要时寻求医疗咨询。
常见问题解答：