产品概述：
本试剂盒采用SDS 碱裂解法，结合DNA 制备膜选择性吸附DNA。同时采用特殊溶液（Buffer ETR 和 Buffer PF） 有效去除内毒素，可从30-50 ml （OD600 为1-1.5）细菌培养物中提取出多至200 μg 高纯度质粒DNA，其内毒素水平控制在0.1 EU/μg.
一、试剂盒组成、贮存、稳定性
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Cat.No. |
UE-MD-EP-10 |
UE-MD-EP-25 |
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Kit size |
10 preps |
25 preps |
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Midiprep column |
10 |
25 |
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1.5 ml Microfuge tube |
30 |
75 |
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Plastic wrench |
1 |
1 |
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RNase A |
120 μl |
270 μl |
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Buffer S1 |
55 ml |
125 ml |
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Buffer S2 |
55 ml |
125 ml |
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Buffer S3K |
55 ml |
125 ml |
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Buffer B |
55 ml |
125 ml |
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Buffer W1 |
80 ml |
200 ml |
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Buffer W2 concentrate |
36 ml |
72 ml |
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ET-free water（70%Ethanol） |
3.6 ml |
9 ml |
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Eluent A |
8 ml |
20 ml |
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Buffer ETR |
4 ml |
10 ml |
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Buffer PF |
1 ml |
3 ml |
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Protocol manual |
1 |
1 |
RNase A：50 mg/ml，室温可贮存6个月，长期贮存于-20 ℃。
Buffer S1：细菌悬浮液。加入 RNase A 后，混合均匀，4℃贮存。
Buffer S2：细菌裂解液（含SDS/NaOH），室温密闭贮存。
Buffer S3K：中和液，室温密闭贮存。
Buffer B：DNA结合溶液，室温密闭贮存。
Buffer W1：洗涤液，室温密闭贮存。
Buffer W2 concentrate：去盐液。使用前，按试剂瓶上指定的体积加入无水乙醇（可用100%乙醇或 95%乙醇）。混合均匀，室温密闭贮存。
ET-free water（70%Ethanol）：使用前，按试剂瓶上指定的体积加入无水乙醇（可用100%乙醇或95% 乙醇）。混合均匀，室温密闭贮存。
Eluent A：洗脱液。室温密闭贮存。
Buffer ETR：内毒素去除液。室温密闭贮存。
Buffer PF：分相缓冲液。室温密闭贮存。
二、注意事项
1. 细菌过量将影响细菌裂解、质粒DNA 的释放，导致内毒素含量过高。
2. 步骤3和步骤4的操作必须温和。剧烈摇晃将导致基因组 DNA 的污染。但混合必须充分，否则影响得率。
3. 在加入Buffer S3K时，蛋白质和基因组DNA 形成粘稠的白色絮状沉淀，必须充分混合均匀，使凝集块中间也得到充分中和凝结。
4. Buffer S2 、Buffer S3K、Buffer B和 Buffer W1含刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套和防护眼镜，避免沾染皮肤、眼睛和衣物，谨防吸入口鼻。若沾染皮肤、眼睛时，要立即用大量清水或生理盐水冲洗，必要时寻求医疗咨询。
常见问题解答：