产品概述：
产品内容
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组分 |
L6023S (30T) |
L6023M (150T) |
L6023L (300T) |
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A. Calcein AM (4 mM in anhydrous DMSO) |
10 μL |
50 μL |
100 μL |
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B. Ethidium homodimer-I (EthD-I) (2 mM in DMSO/H2O 1:4 (v/v)) |
30 μL |
150 μL |
300 μL |
注：本试剂盒次数是按照流式细胞仪一个样品使用0.5 mL工作液规定的。
光谱信息：Calcein AM: Ex/Em = 494/517 nm；EthD-I: Ex/Em = 528/617 nm（结合DNA）。
储存条件
-20˚C避光保存。注意Calcein AM容易水解，需密封干燥保存，稀释工作液需当天配制。有效期见外包装。
产品介绍
Live & DeadTM动物细胞活力/毒性检测试剂盒（Calcein AM, EthD-I）是一种为动物细胞死活检测提供双荧光染色的试剂盒。试剂盒内的两种探针可分别测定细胞内酯酶活性和质膜完整性从而反映细胞活力。本试剂盒可用于荧光显微镜、流式细胞仪、酶标仪以及其他荧光检测系统。
本试剂盒可以应用于大多数的真核哺乳动物细胞，包括贴壁细胞核的某些组织，但不适用于真菌和酵母。该试剂盒与相同用处的台盼蓝相比，更快捷安全且灵敏度更高。
注意事项
1. 使用前请将产品瞬时离心至管底，再进行后续实验。
2. 酚红或血清对于本试剂盒的检测有一定的干扰。
3. 荧光染料均存在淬灭问题，实验操作时请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。
4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
常见问题解答：
◆你们家有两款哺乳动物死活染色试剂盒，分别是Calcein AM，PI（货号L6037）与Calcein AM，EthD-1（货号L6023，这两者的区别是什么？
EthD-1相较于PI来说，对DNA的亲和力更高，低浓度下即可满足染色效果。
◆我如何为LIVE/DEAD细胞活力实验准备死细胞对照？
有两种简单的方法。一种是通过60°C放置20分钟热灭活细胞。第二种是将细胞放入70%乙醇。乙醇固定的细胞可以在冰箱中无限期储存直到使用，可达好几年。
步骤：
a.离心细胞、使细胞沉淀并去除上清
b.固定细胞：在15mL含有细胞团的试管中加入10 mL70%冰乙醇，先开始逐滴加入后震荡，混合均匀。
c.在冰箱中储存直到使用。
d.快使用时，水洗两次且在选择的缓冲液中重悬。
◆用该试剂盒染色后，可以进行后续固定步骤吗？
染色后不可以进行固定步骤。PI作为膜非透性染料，固定后将转移到所有细胞，不再维持死细胞特异性染色。
使用本产品的文献：
1.Regional and sustained dual-release of growth factors from biomimetic tri-layered scaffolds for the repair of large-scale osteochondral defects
Yunsheng Dong，Xun Sun，Zhiling Zhang，Yufei Liu，Lin Zhang，Xiangyun Zhang，Ying Huang，Yanhong Zhao，Chunxiao Qi，Adam C.Midgley，Shufang Wang，Qiang Yang
Applied materials today（Volume 19, June 2020, 100548）
应用方向：仿生三层支架上hUCMSCs细胞死活染色
2.PEG Linker Improves Antitumor Efficacy and Safety of Affibody-Based Drug Conjugates
Qiyu Li,Wenjing Li,Keyuan Xu,Yutong Xing,Haobo Shi,Zhe Jing,Shuang Li，Zhangyong Hong
International Journal of Molecular Sciences
3.Multifunctional Injectable Hydrogel Loaded with Cerium-Containing Bioactive Glass Nanoparticles for Diabetic Wound Healing
Yue-Hua Chen,Zhou-Feng Rao,Yu-Jie Liu,Xiang-Sheng Liu,Yu-Fei Liu,Lan-Ju Xu,Ze-Qi Wang,Jing-Yue Guo,Lin Zhang,Yun-Sheng Dong,Chun-Xiao Qi,Chao Yang,Shu-Fang Wang
Biomolecules 2021, 11(5), 702
4.Impact of an engineered micro-patterned interface on chitosan/glycerol membranes for wound healing
JunjieCai，BoLiu，WeiLiu，LinaLiu，ZheFan
Surfaces and Interfaces
参考文献:
1.Visualization of keratocytes in the human cornea with fluorescence microscopy
应用方向：角膜组织切片染色
2.Effect of matrix metalloproteinases activity on outflow in perfused human organ culture
应用方向：死活细胞染色:评估培养物生存力
3.Metabolizing enzyme toxicology assay chip (MetaChip) for high-throughput microscale toxicity analyses
应用方向：死活细胞染色:高通量微量毒性分析
4.Quantification of effector/target conjugation involving natural killer (NK) or lymphokine activated killer (LAK) cells by two-color flow cytometry
应用方向：流式细胞仪分析死活细胞能力
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