产品介绍
UE质粒小量制备试剂盒(离心法)
本试剂盒采用改进的SDS碱裂解法,吸附柱选择性地吸附DNA的方法达到快速纯化质粒DNA的目的。适合于从1-10 ml(OD600=1-1.5)细菌培养物中提取多至45 μg高纯的质粒DNA,用于测序、体外转录与翻译、限制性内切酶消化、细菌转化等分子生物学实验。
一 、试剂盒组成、贮存、稳定性
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Cat.No.
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UE-MN-P-S-10
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UE-MN-P-S-50
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UE-MN-P-S-250
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UE-MN-P-S-500
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Kit size
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10 preps
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50 preps
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250 preps
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500 preps
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Miniprep column A3
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10
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50
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250
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500
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2 ml Collection tube
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10
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50
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250
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500
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RNase A
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6 μl
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30 μl
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150 μl
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300 μl
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Buffer S1
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3 ml
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15 ml
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75 ml
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150 ml
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Buffer S2
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3 ml
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15 ml
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75 ml
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150 ml
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Buffer S3
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5 ml
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21 ml
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105 ml
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210 ml
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Buffer W1
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6 ml
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28 ml
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145 ml
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280 ml
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Buffer W2 concentrate
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5 ml
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24 ml
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2×72 ml
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2×120 ml
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Eluent
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1 ml
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5 ml
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25 ml
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50 ml
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Protocol manual
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1
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1
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1
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1
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RNase A: 50 mg/ml,室温可贮存6个月,长期贮存于-20℃,使用前瞬时离心至管底。
Buffer S1:细菌悬浮液。加入RNase A后,混合均匀,4℃贮存。
Buffer S2:细菌裂解液(含 SDS/NaOH),室温密闭贮存。
Buffer S3:中和液,室温密闭贮存。
Buffer W1:洗涤液,室温密闭贮存。
Buffer W2 concentrate:去盐液。使用前,按试剂瓶上指定的体积加入无水乙醇(可用100%乙醇或95%乙醇)。混合均匀,室温密闭贮存。
Eluent:洗脱液,室温密闭贮存。
二 、注意事项
1. 加入Buffer S2和Buffer S3的两个步骤操作必须温和。剧烈摇晃将 导致基因组 DNA 的污染。但混合必须充分,否则影响得率。
2. Buffer S2 使用后立即盖紧瓶盖,以免空气中的CO₂中和 Buffer S2中的NaOH,降低裂解效率;裂解时间不宜超过5 min。
3. Buffer S2、Buffer S3和Buffer W1含刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套和眼镜,避免沾染皮肤、眼睛和衣服,谨防吸入口鼻。若沾染皮肤或眼睛时,要立即用大量清水或生理盐水冲洗,必要时寻求医疗咨询。
三、实验准备
1. 第一次使用前,RNase A全部加入Buffer S1 中,4℃贮存。
*对于体积较少的RNase A,瞬时离心至管底,吸取一定体积Buffer S1至RNase A管中混匀再加入Buffer S1中。
2. 准备无核酸和核酸酶污染的Tip头、离心管。
3. 第一次使用前,Buffer W2 concentrate中加入指定体积的无水乙醇混匀备用,做好标记。