产品介绍
产品介绍
酪胺信号放大技术(Tyramide Signal Amplification,TSA)又称催化信号放大技术(Catalyzed Signal Amplification),是一类利用HRP对靶抗原进行高密度原位标记的酶学检测方法,其不但可以用于IF/IHC的信号放大,亦可用于Elisa、ISH等检测。
酪胺信号放大技术可以用于检测用传统方法无法检出的低丰度靶标。基于酪胺的信号放大技术能够提供极强的灵敏度、检测极微量的目的抗原。酪胺信号放大技术极大的降低抗体的用量,节约抗体。酪胺信号放大试剂盒可与传统染色方法结合使用以多色成像,也可以顺序进行两个或更多个酪胺反应以标记一个样品上的不同靶标。
应用范围
酪胺信号放大技术TSA
产品信息
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货号
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产品名称
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规格
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Y6081S
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YF®350酪胺信号放大试剂盒,HRP-羊抗鼠IgG
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50 slides
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Y6081L
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200 slides
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Y6082S
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YF®350酪胺信号放大试剂盒,HRP-羊抗兔IgG
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50 slides
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Y6082L
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200 slides
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Y6083S
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YF®350酪胺信号放大试剂盒,HRP-链霉亲和素
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50 slides
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Y6083L
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200 slides
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Y6084S
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YF®488酪胺信号放大试剂盒,HRP-羊抗鼠IgG
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50 slides
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Y6084L
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200 slides
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Y6085S
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YF®488酪胺信号放大试剂盒,HRP-羊抗兔IgG
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50 slides
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Y6085L
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200 slides
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Y6086S
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YF®488酪胺信号放大试剂盒,HRP-链霉亲和素
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50 slides
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Y6086L
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200 slides
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Y6087S
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YF®555酪胺信号放大试剂盒,HRP-羊抗鼠IgG
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50 slides
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Y6087L
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200 slides
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Y6088S
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YF®555酪胺信号放大试剂盒,HRP-羊抗兔IgG
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50 slides
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Y6088L
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200 slides
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Y6089S
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YF®555酪胺信号放大试剂盒,HRP-链霉亲和素
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50 slides
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Y6089L
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200 slides
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Y6090S
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YF®594 酪胺信号放大试剂盒,HRP-羊抗鼠IgG
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50 slides
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Y6090L
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200 slides
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Y6091S
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YF®594 酪胺信号放大试剂盒,HRP-羊抗兔IgG
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50 slides
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Y6091L
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200 slides
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Y6092S
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YF®594 酪胺信号放大试剂盒,HRP-链霉亲和素
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50 slides
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Y6092L
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200 slides
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Y6093S
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YF®640 酪胺信号放大试剂盒,HRP-羊抗鼠IgG
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50 slides
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Y6093L
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200 slides
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Y6094S
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YF®640 酪胺信号放大试剂盒,HRP-羊抗兔IgG
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50 slides
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Y6094L
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200 slides
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Y6095S
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YF®640 酪胺信号放大试剂盒,HRP-链霉亲和素
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50 slides
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Y6095L
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200 slides
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Y6096S
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YF®680 酪胺信号放大试剂盒,HRP-羊抗鼠IgG
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50 slides
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Y6096L
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200 slides
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Y6097S
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YF®680 酪胺信号放大试剂盒,HRP-羊抗兔IgG
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200 slides
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Y6097L
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50 slides
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Y6098S
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YF®680 酪胺信号放大试剂盒,HRP-链霉亲和素
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50 slides
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Y6098L
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200 slides
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B6099S
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生物素酪胺信号放大试剂盒,HRP-羊抗鼠IgG
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50 slides
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B6099L
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200 slides
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B6100S
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生物素酪胺信号放大试剂盒,HRP-羊抗兔IgG
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50 slides
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B6100L
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200 slides
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B6101S
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生物素酪胺信号放大试剂盒,HRP-链霉亲和素
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50 slides
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B6101L
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200 slides
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储存条件
-20℃避光保存,有效期见外包装。冰袋运输。
产品组分
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组分编号
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组分名称
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组分体积
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50 slides
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200 slides
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见下表
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Tyramide Stock Solution, 200×
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25 µL
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100 µL
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见下表
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HRP-conjugated
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25 µL
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100 µL
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60011
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BSA
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0.5 g
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2 g
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60012
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1× Tyramide Amplification Buffer
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5 mL
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20 mL
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试剂盒组分编号
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标记染料
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Ex/Em
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HRP-conjugated
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Tyramide Stock Solution, 200×
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Goat anti-mouse IgG
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Goat anti-rabbit IgG
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Streptavidin
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YF®350
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347/448
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60008
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60009
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60010
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60001
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YF®488
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490/515
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60002
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YF®555
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555/565
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60003
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YF®594
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590/617
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60004
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YF®640
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642/662
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60005
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YF®680
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681/698
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60006
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Biotin(生物素)
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~
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60007
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注意事项
1. 使用前请将产品瞬时离心至管底,再进行后续实验。
2. 1×Tyramide Amplification Buffer首次使用后,建议小量分装,-20℃保存,避免反复冻融。
3. 与荧光二抗相比,TSA试剂盒显示出更高的灵敏度和更强的信号。因此,实验时一抗的使用浓度较低,这样可以降低非特异性结合带来的背景荧光,建议梯度设置一抗浓度以找到最佳浓度。
4. 如果需要考虑背景荧光,建议设置未与一抗孵育的阴性对照。确保该阴性对照在孵育和洗涤过程中没有被阳性样品中的试剂交叉污染。对于组织样品,还建议对未染色的对照(不添加抗体或酪酰胺)进行成像,以确定组织自发荧光对背景的影响。
5. 建议使用5 μg/mL的HRP结合物,降低浓度可能会影响信号强度和灵敏度。
6. 建议1:200稀释YF®/YO/Biotin - Tyramide。较高的浓度可能会导致信号过强或背景高,可以从1:100到1:1000摸索以找到最佳浓度。
7. 可以在每个酪酰胺反应后通过进行HRP淬灭或抗体剥离,依次使用多个酪酰胺扩增试剂盒来标记同一样品上的不同靶标。
8. 若做多色标记时,依据抗原密度不同选择不同荧光素(低密度抗原选择强染料;高密度抗原选择较弱染料)。标记顺序对最终标记效果有一定影响,需自行摸索。
9. 本产品仅限于科研,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
10. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
实验材料(自备)
(1) 1×PBS
(2) 多聚甲醛(4%多聚甲醛in PBS)
(3) 促渗试剂(0.5% Triton X - 100 in PBS)
(4) 0.1 M柠檬酸钠缓冲液(pH 6.0)
(5) 一抗,二抗
(6) 1×Tyramide Amplification Buffer(含过氧化氢)
(7) 30%过氧化氢
(8) 封闭缓冲液:可将1 g BSA溶于100 mL含0.5% Triton X - 100的PBS中配置成封闭缓冲液,也可选择市面上在售封闭缓冲液。
下列组分仅用于Biotin-Tyramide试剂盒中
(1) 生物素封闭清洗缓冲液:含1% BSA和0.05% Tween 20的PBS。
(2) 未标记的链霉亲和素溶液:含0.1 mg/mL链霉亲和素的生物素封闭清洗缓冲液。
(3) 生物素溶液:含0.5 mg/mL生物素的生物素封闭清洗缓冲液。
(4) 以下参考步骤,可用于细胞或组织切片的酪酰胺染色,每个样品使用100 µL染色液(足以覆盖96孔板的一个孔或约1 cm2的组织部分)。可根据不同的样本尺寸增加或减少染色液用量。
约1 cm2的组织部分)。可根据不同的样本尺寸增加或减少染色液用量。