产品介绍

UE植物总RNA小量制备试剂盒

本试剂盒用于从各种植物叶片、多糖块茎/根部/种子、水果果肉以及真菌中提取总RNA。提取的总RNA分子完整、纯度高，适用于Northern Blot 、RT-PCR、体外翻译、Primer Extension 、S1核酸酶作图、RNase 保护测定、构建 cDNA 文库等各种分子生物学实验。

一、试剂盒组成、贮存、稳定性

Buffer RL-1：细胞裂解液RL。室温密闭贮存。低温下可能会有沉淀析出，需在60℃水浴让沉淀完全溶解并冷却至室温后使用。

Buffer PL-1：细胞裂解液PL。室温密闭贮存。低温下可能会有沉淀析出，需在60℃水浴让沉淀完全溶解并冷却至室温后使用。

Buffer RW1：洗涤液。室温密闭贮存。

Buffer RW2：去盐液，为浓缩液，使用前须按试剂瓶子标签所示，加入无水乙醇进行稀释。

中和液。室温密闭贮存。

RNase-Free ddH2O：RNA洗脱液。室温密闭贮存。

二、注意事项

1. RNA提取完成后建议置于冰上待用，若不能立刻进行后续实验，请保存于-80℃。

2. RNA分管尽快使用，电泳检测用无酶水进行冲洗，电泳缓冲液用RNA无酶水配置，提高电压并缩短跑胶时间。

3. 选新鲜组织样本，避免反复冻融，组织离体后须迅速放入液氮中速存，后期转移至-80℃长期保存。

4. 所有试剂用DEPC处理过的溶剂配制。请选用RNase-free枪头和离心管，以避免提取过程中RNA被RNase降解。

三 、实验准备

1. 自备试剂：无水乙醇（AR）、β-巯基乙醇或DTT

2. Buffer RW2在使用前需按照试剂瓶标签所示加入无水乙醇进行稀释后使用；

3. (可选)提升裂解液的变性能力：使用前分装适量Buffer RL-1或Buffer PL-1按每mL Buffer RL-1 或Buffer PL-1加入10µL β-巯基乙醇或20μL的2M DTT，混合液室温可保存1月。β-巯基乙醇/DTT 能打断 RNase分子间的二硫键，高效灭活 RNase，提高RNA质量。由于β-巯基乙醇/DTT 的毒性，多数情况下，不添加也可以得到完整的RNA。

4. 试剂盒提供多种裂解缓冲液：Buffer RL-1和Buffer PL-1，具体选择参考表1 。

5. 若不确定植物种类，推荐优先尝试Buffer PL-1。

表1 不同种类样本推荐的样本处理量及裂解液