产品介绍
UE细菌基因组DNA小量制备试剂盒
本试剂盒采用独特的细胞裂解和相分离技术,结合 DNA制备膜选择性地吸附DNA的方法达到纯化基因组DNA 的目的。适合于从1.0×109细菌中获得多至20 μg的基因组DNA。 用于PCR、Southern 印迹分析、RAPD、RFLD等分子生物学实验。
一、试剂盒组成、贮存、稳定性
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Cat.No.
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UE-MN-BT-GDNA-50
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UE-MN-BT-GDNA-250
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Kit size
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50 preps
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250 preps
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Miniprep column
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50
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250
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Spin-filter
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50
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250
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2 ml Microfuge tube
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150
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750
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1.5 ml Microfuge tube
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50
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250
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RNase A
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20 μl
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100 μl
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Lysozyme
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60 mg
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2×140 mg
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Buffer S
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10 ml
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50 ml
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0.25M EDTA
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2 ml
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10 ml
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Buffer G-A
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26 ml
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130 ml
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Buffer G-B
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26 ml
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125 ml
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Buffer DV(empty)
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1
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1
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Buffer DV-A
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5 ml
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10 ml
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Buffer BV
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25 ml
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125 ml
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Buffer W1
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28 ml
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145 ml
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Buffer W2 concentrate
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24 ml
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2×72 ml
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Eluent
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12 ml
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60 ml
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Protocol manual
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1
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1
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RNase A:50 mg/ml,室温贮存6个月;长期贮存于-20℃。
溶菌酶:50%甘油溶解溶菌酶,使溶菌酶浓度为50 mg/ml,-20℃密闭贮存。
Buffer S:细菌原生质制备液,加入RNase A后,4℃密闭贮存。
0.25M EDTA:室温密闭贮存。
Buffer G-A:裂解液,室温密闭贮存。
Buffer G-B:蛋白去除液,室温密闭贮存。
Buffer DV-A:Buffer DV的制备液(请参照实验准备 Buffer DV的配制方法配制),室温密闭贮存。
Buffer DV:相分离液,室温密闭贮存。
Buffer BV:DNA结合液,室温密闭贮存。
Buffer W1:洗涤液,室温密闭贮存。
Buffer W2 concentrate:去盐液。使用前,按试剂瓶上指定的体积加入无水乙醇(可用100%乙醇或95%乙醇)并混合均匀,室温密闭贮存。
Eluent:2.5 mM Tris-HCl,pH 8.5,室温密闭贮存。
二、注意事项
Buffer G-B 、Buffer BV和 Buffer W1含刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套和眼镜,避免沾染皮肤、眼睛和衣服、谨防吸入口鼻。若沾染皮肤、眼睛时,要立即用大量水或生理盐水冲洗,必要时寻求医疗咨询。
三、实验准备
1. 第一次使用时,在Buffer W2中按试剂瓶上指定的体积加入无水乙醇并混合均匀。
2. 准备 Buffer DV:按 2 ml Buffer DV-A,125 ml 异丙醇,75 ml 异丁醇的比例,加入提供的试剂瓶中,混合均匀。
3. 4℃预冷 Buffer DV。
4. 第一次使用试剂盒时,用50%甘油溶解溶菌酶,使溶菌酶浓度为50 mg/ml。
5. 第一次使用试剂盒时将随试剂盒携带的 RNase A全部加入Buffer S中,混合均匀。
6. 准备65℃水浴。
7. 检查Buffer G-A和 Buffer G-B 是否出现沉淀,若出现沉淀,于65℃水浴加热至沉淀完全溶解后再使用。
8. 将 Eluent或去离子水加热至65℃有利于基因组DNA 的充分洗脱。