产品介绍

UE 质粒中量制备试剂盒

本试剂盒采用改进的SDS 碱裂解法，结合 DNA 制备膜选择性地吸附DNA的方法达到快速纯化质粒 DNA 的目的。适合于从30-100 ml（OD600 为1-1.5）细菌培养物中提取多至200 μg 高纯的质粒 DNA，用于测序、体外转录 与翻译、限制性内切酶消化、细菌转化等分子生物学实验。

一、试剂盒组成、贮存、稳定性

RNase A：50 mg/ml, 室温贮存6个月；长期贮存于-20℃。

Buffer S1：细菌悬浮液。加入RNase A后，混合均匀，4℃贮存。

Buffer S2：细菌裂解液（含SDS/NaOH）。室温密闭贮存。

Buffer S3K：中和液，室温密闭贮存。

Buffer B：DNA结合溶液，室温密闭贮存。

Buffer W1：洗涤液，室温密闭贮存。

Buffer W2 concentrate：去盐液。使用前，按试剂瓶上指定的体积加入无水乙醇（可用100%乙醇或95%乙醇）,混合均匀，室温密闭贮存。

Eluent：洗脱液，室温密闭贮存。

二、注意事项

1. 细菌过量将影响细菌裂解及质粒DNA的释放。

2. 在步骤3和步骤4中操作必须温和。剧烈摇晃，将导致基因组DNA的污染。但混合必须充分，否则影响得率。

3. 在加入Buffer S3K时，蛋白质和基因组DNA形成粘稠的白色絮状沉淀，必须充分混合均匀，使凝集块中间也得到充分中和凝结。

4. 将Eluent或去离子水加热至65℃，有利于提高洗脱效率。

5. DNA 分子呈酸性，建议在2.5 mM Tris-HCI, pH 7.0-8.5 洗脱液中保存。

6. Buffer S2、Buffer S3K、Buffer B和 Buffer W1试剂含刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套和眼镜，避免沾染皮肤、眼睛和衣服，谨防吸入口鼻。若沾染皮肤、眼睛时，要立即用大量清水或生理盐水冲洗，必要时寻求医疗咨询。

三、实验准备

1. 第一次使用前，RNase A全部加入Buffer S1中 ，4℃ 贮存。

2. 第一次使用时，在Buffer W2 concentrate中按试剂瓶上指定的体积加入无水乙醇。

3. 准备无核酸和核酸酶污染的 Tip头、离心管。

4. 4℃预冷Buffer S3K和Buffer B。

5. 使用前，检查Buffer S2是否出现沉淀，应于37℃温浴加热溶解并冷却至室温后再使用。

6. 需要使用负压装置。（推荐使用百赛利德配套负压装置Cat No.:BS-VM或BS-VM-II）