RIPA 裂解液(强,无抑制剂)

产品货号: R6166/R6166S
应用范围: 蛋白样品制备
产品规格: 10 mL 100 mL
价 格 :
21
数  量:
- +
  • 说  明  书: R6166/R6166S

产品介绍

产品介绍

RIPA裂解液(强,无抑制剂)可用于裂解细胞/组织,有效提取细胞质、细胞膜及细胞核蛋白,获得的蛋白样品可用于常规的蛋白分析,如Western Blot、IP等。本产品的主要成分为100 mM Tris-HCL (pH 8.0)、150 mM NaCl、1% Triton X-100、1% deoxycholic acid、0.1% SDS等。

UElandy提供的另外一款Western及IP细胞裂解液(W6001),其有效裂解成分为1% NP-40。相较于RIPA裂解液(强,无抑制剂),其裂解能力相对较弱,但能够满足一般用户需求。若发现Western及IP细胞裂解液效果不是非常理想,可以尝试使用裂解强度更高的RIPA裂解液(强,无抑制剂)(R6166)。

以贴壁细胞(6孔板)举例,每孔200μLRIPA裂解液,100mL试剂大概可以用于500个孔。

应用范围

细胞裂解、Western-blot、IP

产品货号

R6166S/R6166

储运条件

4℃保存,有效期见外包装;冰袋运输。

产品特点

效果强烈:可以裂解细胞核蛋白,裂解效果强;

适用范围广适用于WB、IP实验。

产品组分

组分 R6166S R6166
RIPA裂解液 10mL 100mL

注意事项

RIPA裂解液(强,无抑制剂)含有较高浓度的去垢剂,因此与Bradford法测定蛋白浓度不兼容,如需测定蛋白浓度可选本公司生产的BCA蛋白定量检测试剂盒(B6167/B6169)。

RIPA裂解液(强,无抑制剂)不含有蛋白酶或其他酶的抑制剂,使用前请根据实验需求加入酶抑制剂,以防蛋白降解。

裂解过程需在冰上进行。

以HeLa细胞为例,1×106cells需要200μL预冷的RIPA裂解液,该裂解液的量相对较充足,在有限细胞的情况下,如需提高蛋白浓度,可适当减少裂解液的量。

裂解产物中如若出现的一小团透明胶状物,属于正常现象,是含有基因组DNA的复合物。

由于温度的变化可能会导致RIPA裂解液页面上漂浮有一层油膜,这层油膜是不影响RIPA裂解液的正常使用。

RIPA裂解液中有SDS成分的存在,4℃保存时可能导致SDS析出,使用前可以37℃水浴加热至完全溶解,之后恢复至室温再继续使用即可。

本产品仅限于科研,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品和药品,不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

自备材料

1. 耗材

离心管

(2)冰

试剂

(1)蛋白酶抑制剂

(2)磷酸酶抑制剂(可选)

(3)1×PBS

FAQ

问:得到的总蛋白量低是什么原因?该怎么解决?

答:可能是有些细胞样本比较难裂解,建议细胞充分悬浮,并且延长裂解时间。

问:蛋白浓度过低是什么原因?该怎么解决?

答:可能使用了较多的裂解液Buffer,建议使用更少量的裂解液Buffer。

问:蛋白水解是什么原因?该怎么解决?

答:裂解液中没有蛋白酶抑制剂,建议在裂解前加入蛋白酶抑制剂。

问:没有磷酸化蛋白是什么原因?

答:磷酸化蛋白可能被磷酸酶去磷酸化了,裂解液中没有磷酸酶抑制剂,建议裂解前加入蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂;也可能是蛋白样本中没有磷酸化蛋白。

已发表文献

R6166/R6166S

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