产品介绍

产品介绍
细胞增殖检测是评估细胞健康程度、遗传毒性及抗肿瘤药物效果的基础实验手段。检测细胞增殖最精确的方法是BrdU法，EdU法检测试剂盒是BrdU法的革命性突破。EdU（5-乙炔基-2’-脱氧尿苷）是一种嘧啶类似物，在DNA合成期整合入DNA双链，检测基于“点击”反应，一种由铜催化的叠氮化合物和炔烃作用发生共价反应形成共价键。点击法的EdU标记增殖快速有效、易于使用，只需多聚甲醛固定和Triton X-100促渗就可以使检测试剂进入细胞，只需少量的叠氮化染料即可非常有效地标记出整合的EdU；BrdU方法需要DNA变性（如酸变性、热变性或者用DNase消化）暴露出BrdU，从而方便BrdU抗体结合。本试剂盒包含EdU法检测所需要的所有组分，可以用于体外培养细胞的增殖检测。

应用范围：细胞增殖检测（细胞成像流式通用款）

细胞增殖、分化、生长与发育、DNA损伤修复、病毒复制等方面的研究

产品信息

储运条件

-20℃避光保存，有效期见外包装；开封后，保存温度详见说明书。冰袋运输。

产品特点

简单高效：无需抗原抗体反应，基于小分子化学反应的检测方法简单高效，反应仅需要几分钟；

灵敏度高：无需抗体，检测染料仅BrdU抗体的1/500，很容易扩散，即便是单个增殖细胞也能准确检测；

快速省时：无需过夜，省却了抗原抗体反应的复杂繁琐步骤，完成整个检测周期仅需5小时。

产品组分

注：E组分溶解后分装冻存。

规格：如果用于荧光显微镜检测，所能使用次数为上述各个规格的最大使用次数（针对96孔板培养的细胞），如C6043S可检测20个孔的样品（不同容器的具体用量可参考表2）；如果用于流式检测，所能使用次数为上述各个规格的最小使用次数，如C6043S可检测2个样品。

荧光光谱数据：YF®488 Azide：495/519 nm；YF®555 Azide：555/565 nm；YF®594 Azide：590/617 nm；YF®647A Azide：650/670 nm；Hoechst 33342：350/461 nm (bound to DNA)

注意事项

1. 使用前请将产品瞬时离心至管底，再进行后续实验。

2. EdU (10 mM) 首次使用时建议根据实验需要分装，-20ºC保存。

3. Click-iT EdU缓冲液添加物溶液首次配制时建议根据实验需要适当分装，-20ºC保存。如果溶解后有白色物质析出，请上下颠倒多次，待全部溶解后使用。如果该溶液颜色变成棕色，说明该组分的有效成分已失效，请弃用。

4. 可设置未进行EdU处理的细胞经YF®Dye Azide染色作为阴性对照样品，用于确定合适的检测条件，此设置对干流式细胞术检测尤为重要，可以明确阴性信号的强度以划分阴性信号跟阳性信号的界限。

5. 本品不建议与TUNEL试剂盒同时检测。这是由于EdU的结构中有-OH存在，会影响TUNEL的反应过程。

6. 本产品属于铜离子催化的点击反应，可能会造成部分荧光蛋白或荧光染料淬灭，建议在点击反应完成后进行反应和检测，目前已确定受影响的染料有PE及PE tandems染料；

7. 铜离子会影响GFP、RFP、mCherry等荧光蛋白的荧光，因此本产品不适用于带GFP、RFP、mCherry 等荧光的细胞检测。

8. 由于铜离子会破坏肌动蛋白结构，影响鬼笔环肽检测，所以Phalloidin (鬼笔环肽)不兼容点击反应，推荐使用 Tubulin-Tracker Red (YP0054)进行细胞微管的检测。

9.开封后的组分保存条件请按照说明书上进行保存。

10. 荧光染料均存在淬灭问题，实验操作时请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。

11.本产品仅限于科研，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

12.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

自备材料

1. 耗材

96/24/12/6孔培养板或培养皿

2. 试剂

(1)10 mM PBS, pH7.2~7.6

(2)4%多聚甲醛固定液（in PBS）

(3)促渗试剂（0.5% Triton X-100 in PBS）

(4)2 mg/mL甘氨酸溶液（in ddH2O）

(5)3% BSA in PBS, pH7.2~7.6

(6)1% BSA in PBS, pH7.2~7.6

(7)ddH₂O