产品介绍
产品货号：D1010S, D1010L
产品规格：10 mg, 500 mg
储存条件：-20℃干燥避光保存，有效期见外包装。
应用范围：1）活细胞、组织或生物体内luc标记基因和萤光素酶-融合基因体内/体外表达的成像分析；
2）报告基因分析，免疫分析和ATP萤光卫生监测分析。
产品参数
外观：可溶于水的浅黄色固体
Ex/Em：328/533 nm
产品介绍
活体成像技术（optical in vivo imaging）目前主要采用生物发光（bioluminescence）与荧光（fluorescence）两种技术，生物发光法是基于萤光素酶能催化底物化学发光的原理，将体外能稳定表达萤光素酶的细胞株植入动物体内，与后期注射入体内的底物发生反应，利用光学系统检测光强度，间接反映出细胞数量的变化或细胞的定位。这项技术已被广泛应用于多个领域，最常用的有肿瘤或疾病动物模型的建立，并可用于病毒学研究、siRNA研究、干细胞研究、蛋白质相互作用研究等。
D-Luciferin是萤光素酶（Luciferase）的常用底物，普遍用于整个生物技术领域，特别是体内活体成像技术。在ATP和萤光素酶的作用下，萤光素能够被氧化，并且在560 nm检测到其化学发光。Luciferin由luc基因编码，该基因作为报告基因在多种细胞中存在。由于化学发光的低背景性，luc基因在很低的表达水平下就可以被监测到。此外，萤光素/萤光素酶被用来测量10-15摩尔量的ATP。相比于基础版D-萤光素钾盐（D1009），D-萤光素钾盐（增强型）在相同浓度下，底物与萤光素酶反应后发光更强且更持久。
使用方法
1. 体外发光检测
（1）用314 µL蒸馏水溶解10 mg D-萤光素钾盐，配制成100 mM的储存液（200×）。混匀后立即使用或分装后-20℃冻存。
（2）用细胞培养基1:200稀释储存液，配置工作液（终浓度150 μg/mL），即1×D-萤光素钾盐。
（3）去除培养细胞的培养基。
（4）向细胞内添加适量1×萤光素工作液，然后进行图像分析（或者细胞放在37℃短时间孵育后检测可增强信号）。
2. 活体成像分析
（1）用无菌的1×PBS配制D-萤光素钾盐工作液（15 mg/mL），即向10 mg D-萤光素钾盐中，加入667 µL 1×PBS，0.2 µm滤膜过滤除菌。使用时，需保持冰冷且避光。
（2）参照下表，根据不同的注射方式，注射不同的体积。
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注射方式
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注射剂量
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静脉注射
（25-27 gauge针头）
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按10 μL/g体重浓度，加入相应体积的15 mg/mL萤光素工作液
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腹腔注射
（25-27 gauge针头）
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按10 μL/g体重浓度，加入相应体积的15 mg/mL萤光素工作液
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肌肉注射
（27 gauge针头）
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50 μL，浓度为1–2 mg/mL萤光素工作液
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鼻内注射（pipette）
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50 μL，浓度为3 mg/mL萤光素工作液
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（3）注射入体内5-10 min后，进行成像分析。
注意事项
1. D-Luciferin, Potassium Salt样品的背景荧光主要来源于萤光素，如果不立即使用本产品，建议分装后，-20℃避光保存。
