产品概述：
储存条件
4℃避光保存，有效期见外包装。开封后，保存温度详见说明书。
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组分 |
24T |
48T |
96T |
使用方法 |
开封后保存条件 |
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A. 标准品 |
2000 pg |
2000 pg |
2×2000 pg |
按说明书进行稀释 |
-20℃可存放一月 |
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B. 标准稀释液 |
16 mL |
16 mL |
16 mL |
即用型 |
4℃可存放一月 |
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C. 浓缩生物素化抗体（100×） |
30 μL |
60 μL |
2×60 μL |
按说明书进行稀释 （现配现用） |
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D. 生物素化抗体稀释液 |
16 mL |
16 mL |
16 mL |
即用型 |
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E. 浓缩酶结合物（避光 100×） |
30 μL |
60 μL |
2×60 μL |
按说明书进行稀释 （现配现用） |
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F. 酶结合物稀释液 |
16 mL |
16 mL |
16 mL |
即用型 |
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G. 浓缩洗涤液（20×） |
16 mL |
16 mL |
25 mL |
即用型 |
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H. 显色剂（避光） |
6 mL |
6 mL |
12 mL |
即用型 |
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I. 终止液 |
12 mL |
12 mL |
12 mL |
即用型 |
4℃或常温保存 |
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J. 预包被96孔板 |
8×3 |
8×6 |
8×12 |
即用型 |
密封干燥4℃保存 |
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K. 封板胶纸 |
1张 |
2张 |
4张 |
即用型 |
注：终止液和显色剂具有腐蚀性，一旦接触到液体，请尽快用大量清水冲洗。
产品介绍
Human IL-2 ELISA Kit (Human Interleukin-2 Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit) ，即人白细胞介素 2 ELISA 试剂盒，可以定量检测人血清、血浆或细胞培养上清液等样本中的天然和重组 IL-2 浓度。
白细胞介素 2 是一种多效性细胞因子，在机体的免疫应答中起重要作用。人 IL-2 含有 133 个氨基酸残基，分子量为 15.5 kDa。天然 IL-2 在 N 端含有糖基，但糖基对 IL-2 的生物学活性无明显影响，等电点为 6.6 -8.2。人 IL-2 基因定位于第 4 号染色体，长约 5 kb，由 4 个外显子和 3 个内含子组成。成熟的人 IL-2 与犬、大鼠、猫和猴 IL-2 的氨基酸同源性分别达 73%、 66%、78%和 97%。IL-2 最重要的作用是诱导 T 淋巴细胞增殖和分化，此外，IL-2 还可调节多种细胞的免疫应答。如：促进 CTL、NK 和 LAK 等多种杀伤细胞的分化和效应功能，并诱导杀伤细胞产生 IFN-γ、TNF-α 等细胞因子；直接作用于 B 细胞，促进其增殖、分化和 Ig 分泌；活化巨噬细胞等。
人和小鼠 IL-2 基因 DNA 序列有 63％同源性。IL-2 具有沿种系谱向上有约束性，向下无约束性的特点：如人的 IL-2 能促进小鼠 T 细胞的增殖，而小鼠的 IL-2 不能维持人 T 细胞的生长。IL-2 体内的半衰期只有 6.9 min。有报道用 PEG 对 IL-2 加以修饰，对其生物学活性无影响，半衰期可延长 7 倍左右。目前关于 IL-2 的生物学作用大都是体外实验的结果。在体内，IL-2 有抗肿瘤、抗微生物感染、引起移植排斥和自身免疫以及免疫调节等作用。可溶性 IL-2R 作为免疫抑制剂，对白血病、移植排斥和自身免疫病可能有治疗作用。具有中和活性的抗 IL-2 抗体可抑制 IL-2 的生物学活性。
本试剂盒采用双抗体夹心 ELISA 法检测样品中人 IL-2 浓度。在人 IL-2 单克隆抗体预包被酶标板中加入适度稀释的样品和标准品，其中的 IL-2 会与其单抗结合，洗去游离成分；加入生物素化的抗人 IL-2 抗体，抗人 IL-2 抗体与结合在单抗上的人 IL-2 结合而形成免疫复合物，洗去游离的成分；加入辣根过氧化物酶标记的亲合素，生物素与亲合素特异性结合，洗去未结合的酶结合物；加入显色剂，若反应孔中有 IL-2，辣根过氧化物酶会使无色的显色剂出现蓝色；加终止液变为黄色。在 450 nm 下测 OD 值，人 IL-2 浓度与 OD 450 值之间呈正比，可通过绘制标准曲线计算出样品中人 IL-2 浓度。
常见问题解答：
◆背景信号强是什么原因？
1.洗板不充分。将洗涤缓冲液加入孔中洗涤，确保孔区域洗涤充分；确保已在洗涤前弃去所有残留抗体溶液；增加洗涤次数。
2.链亲和素-HRP结合物过量。检查偶联物的稀释度，在推荐的稀释度下使用。
3.封闭不充分。检查封闭液；延长封闭时间。
4.孵育时间过长。缩短孵育时间。
5.样品或标准品中含干扰物质。设置对照。
6.缓冲液受污染。新鲜配置缓冲液。
◆没有信号？
1.试剂添加顺序错误或试剂配制不正确。重复实验；检查试剂配制方法；复核试验试剂添加流程。
2.HRP被叠氮化合物污染。使用新鲜配制的试剂。
3.抗体用量不足。检查是否使用了推荐的抗体量；增加抗体用量（浓度）。
4.使用了含胎牛血清的缓冲液复溶抗体。检查使用的试剂。
5.捕获抗体与板结合较差。使用ELISA板，而非组织培养板；使用不含其他杂蛋白的PBS溶解抗体。
6.缓冲液受污染。新鲜配置缓冲液。
◆整块板呈现规则蓝色？
1.洗板不充分或跳过洗涤步骤未去除残留的非结合过氧化物酶。严格按照说明书洗涤流程操作。
2.底物溶液预混太早不新鲜。底物溶液混合后须立即使用。
3.封板胶纸或试剂储液槽重复使用导致HRP残留污染。每步均需使用新的封板胶纸或试剂储液槽。
4.缓冲液有金属或HRP污染。新鲜配置缓冲液。
◆标准曲线差？
1.链亲和素-HRP结合物量不足。检查倍性稀释是否正确。
2.捕获抗体与板结合较差。使用酶标板，而非组织培养板；使用不含其他杂蛋白的PBS溶解抗体。
3.检测抗体量不足。检查稀释度是否正确。
4.孵育时间不足。延长底物溶液孵育时间。
5.实验操作流程有误。严格按照说明书操作流程。
6.标准曲线稀释计算错误。重新计算制作新的标准曲线。
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